Abstract In Argentina, hemolytic uremic syndrome (HUS) caused by Shiga toxin-producing Escherichia coli (STEC-HUS) infection is endemic, and reliable data about prevalence and risk factors have been available since 2000. However, information about STEC-associated bloody diarrhea (BD) is limited. A prospective study was performed during the period October Surveillance; 2018-June 2019 in seven tertiary-hospitals and 18 referral units from different regions, aiming of STEC-HUS cases in the same hospitals and during the same period were also assessed. Twenty-nine (4.1%) of the BD patients were STEC-positive, as determined by the Shiga Toxin Quik Chek (STQC) test and/or the multiplex polymerase chain reaction (mPCR) assay. The highest fre-quencies were found in the Southern region (Neuquén, 8.7%; Bahía Blanca, 7.9%), in children between 12 and 23 month of age (8.8%), during summertime. Four (13.8%) cases progressed to HUS, three to nine days after diarrhea onset. Twenty-seven STEC-HUS in children under 5 years of age (77.8%) were enrolled, 51.9% were female; 44% were Stx-positive by STQC and all by mPCR. The most common serotypes were O157:H7 and O145:H28 and the prevalent geno-types, both among BD and HUS cases, were sfx2a-only or -associated. Considering the endemic behavior of HUS and its high incidence, these data show that the rate of STEC-positive cases is low among BD patients. However, the early recognition of STEC-positive cases is important for patient monitoring and initiation of supportive treatment.

Resumen En Argentina, el síndrome urémico hemolítico asociado a Escherichia coli productor de toxina Shiga (STEC-SUH) es endémico y, desde 2000, de notificación obligatoria. Sin embargo, la información sobre diarrea sanguinolenta (DS) asociada a STEC (DS-STEC) es limitada. Se realizó un estudio prospectivo desde octubre de 2018 hasta junio de 2019 en siete hospitales de tercer nivel y 18 unidades de referencia de diferentes provincias argentinas, con el objetivo de determinar la frecuencia de casos de DS-STEC en 714 niños de 1 a 9 años que tuvieron DS (I) y la tasa de progresión de DS a SUH en dicha cohorte (II). También se evaluó el número y distribución regional de casos de STEC-SUH en los mismos hospitales en dicho período. Veintinueve casos de DS (4,1%) fueron STEC-positivos, determinados por Shiga Toxin Quik Chek (STQC) o PCR múltiple (mPCR). Las frecuencias más altas se encontraron en el sur del área relevada (Neuquén, 8,7%; Bahía Blanca, 7,9%), en niños de 12 a 23 meses (8,8%), en verano. Cuatro casos de DS-STEC (13,8%) progresaron a SUH, de tres a nueve días después del inicio de la diarrea. Se registraron 27 niños con STEC-SUH, estos fueron mayoritariamente <5 anos (77,8%) del sexo femenino (51,9%). El 44% de estos casos fueron Stx-positivos por STQC y todos por mPCR. Los serotipos más comunes fueron O157:H7y O145:H28, y el genotipo predominante fue stx2a, solo o asociado, en DS y SUH. Considerando el comportamiento endémico del SUH y su alta incidencia, estos datos muestran que la tasa de casos de DS-STEC es baja. Sin embargo, su reconocimiento temprano es importante para el seguimiento e inicio del tratamiento de sostén.

Abstract Introduction: the use of natural nutritional supplements can be used as a coadjuvant therapy since they have several phytochemicals with potential antioxidant effects that could influence lipid and glycemic metabolism. Objectives: to determine the effect of natural propolis supplementation on lipid metabolism and liver antioxidant activity. Material and methods: 20 male Wistar albino rats (8 weeks) were divided into two groups of 10 animals each. Subsequently, they were fed two different types of diet for 90 days: a standard diet for the control group (diet C) and a standard diet + 2 % propolis (diet P). Hematological and biochemical parameters were assessed. The livers were extracted and washed with saline solution, and the cytosolic fractions were prepared fresh for additional analysis of antioxidant enzymes catalase, superoxide dismutase, glutathione peroxidase, and glutathione reductase. Results: after consuming the diet supplemented with propolis, we found a reduction in glucose (p < 0,01), total cholesterol (p < 0,001), GOT (p < 0,05) and GPT (p < 0,01), whereas the propolis supplement induced an increase in the hepatic activity of SOD (p < 0,001), CAT (p < 0,01) and GR (p < 0,05). Conclusion: the present study reveals that a dietary propolis supplement (2 %) can improve the lipid and glycemic profles, also increasing antioxidant enzimes and reducing the release of liver transaminases.

Resumen Introducción: el uso de suplementos nutricionales naturales puede ser una terapia complementaria ya que tienen fitoquímicos con posibles efectos antioxidantes que pueden mejorar la regulación del metabolismo lipídico y glucémico. Objetivos: determinar el efecto de la suplementación con propóleo natural sobre el metabolismo lipídico y la actividad antioxidante hepática. Material y métodos: 20 ratas albinas Wistar macho (8 semanas) se dividieron en dos grupos de 10 animales cada uno y se sometieron a un período de 90 días en el que se alimentaron con dos tipos diferentes de dietas: estándar para el grupo de control (dieta C) y dieta estándar + 2 % de propóleo (dieta P). Se determinaron los parámetros hematológicos y bioquímicos. Se extrajeron los hígados, se lavaron con solución salina y las fracciones citosólicas se prepararon frescas para análisis adicionales de las enzimas antioxidantes catalasa, superóxido-dismutasa, glutatión-peroxidasa y glutatión-reductasa. Resultados: tras el consumo de la dieta con suplemento de propóleo, encontramos una reducción de la glucosa (p < 0,01), el colesterol total (p < 0,001), la GOT (p < 0,05) y la GPT (p < 0,01), mientras que dicha dieta indujo un incremento en la actividad hepática de SOD (p < 0,001), CAT (p < 0,01) y GR (p < 0,05). Conclusión: el presente estudio revela que el suplemento nutricional de propóleo al 2 % puede mejorar significativamente el perfil lipídic, el glucémico y las enzimas antioxidantes, y reducir la liberación de GOT y GPT hepáticas.

Abstract Shiga toxin-producing Escherichia coli (STEC) are a heterogeneous group of foodborne pathogens causing a broad spectrum of human disease, from uncomplicated diarrhea to hemolytic uremic syndrome (HUS). In this study, we report an HUS case associated with an O59:NM H19 mstrain, harboring stx2a, iha, lpfAO26, lpfAO113 genes associated with STEC, and aatA, aap, pic, sigA, agg4A genes associated with enteroaggregative E. coli (EAEC), named Stx-EAEC. The strain showed low toxicity on Vero cells, and was resistant to streptomycin and trimethoprim/sulfonamides. The child carried the bacteria for more than 100 days. Since the large outbreak associated with Stx-EAEC O104:H4, many strains with similar profiles have been described. In Germany, an O59:NM[H19] strain, with comparable characteristics to the Argentine strain, was isolated from a bloody diarrhea case. In Argentina, this is the first report of an HUS case associated with a Stx-EAEC infection, and represents a new challenge for the surveillance system. © 2019 Published by Elsevier Espana, S.L.U. on behalf of Asociacion Argentina de Microbiolog´a. This is an open access article under the CC BY-NC-ND license (https://creativecommons.org/ licenses/by-nc-nd/4.0/).

Resumen Escherichia coli productor de la toxina Shiga (STEC) es un grupo heterogéneo de patógenos transmitidos por alimentos que causan un amplio espectro de enfermedades humanas, desde diarrea no complicada hasta síndrome urémico hemolítico (SUH). Nosotros informamos de un caso de SUH por O59:NM[H19], que portaba los genes stx2a, iha, lpfAo26, lpfAoii3 asociados con STEC, y los genes aatA, aap, pic, sigA, agg4A de E. coli enteroagregativo (EAEC), llamado EAEC-Stx. La cepa mostró baja citotoxicidad en las células Vero, y fue resistente a estreptomicina y trimetoprima/sulfonamidas. El niño excretó la bacteria durante más de 100 días. Desde el brote asociado con EAEC-Stx O104:H4, se describieron muchas cepas con perfiles similares. En Alemania se aisló una cepa O59:NM[H19] de una diarrea sanguinolenta, con características comparables a la cepa argentina. Este es el primer informe de un caso de SUH asociado a una infección por EAEC-Stx, y representa un nuevo desafío para el sistema de vigilancia. © 2019 Publicado por Elsevier Espana, S.L.U. en nombre de Asociación Argentina de Microbiología. Este es un artículo Open Access bajo la licencia CC BY-NC-ND (http://creativecommons. org/licenses/by-nc-nd/4.0/).

ABSTRACT Some health professionals discourage yogurt because of the risk of Hemolytic Uremic Syndrome (HUS), a serious disease caused by strains of Shiga toxin-producing E. coli (STEC). These bacteria can pass from the intestine of cattle to meat or milk under inadequate working conditions in slaughterhouses or milking plants. Undercooked hamburgers the main is vector of disease and unpasteurized raw milk or dairy products made with it, are another risk factors. In the dairy industry, yoghurt is made from milk that undergoes a double heat treatment. There are no reports of the presence of STEC in industrial yogurts in the modern bibliography, and reviews and meta-analysis do not point to yogurt as a risk factor for STEC, but rather unpasteurized milk. In this context, and given the scientific evidence currently available regarding STEC, HUS and yogurt, it would seem that we are in the presence of a spurious correlation, the association between two facts that have no causal relationship between them, rather than a scientific fact for which one (yogurt) may be responsible for the other (HUS).

RESUMEN Algunos profesionales de la salud desaconsejan el consumo del yogur por el riesgo de provocar Síndrome Urémico Hemolítico, una enfermedad grave causada por cepas de E. coli productor de toxina Shiga (STEC por sus siglas en inglés). Estas bacterias pueden pasar del intestino del ganado vacuno a la carne o a la leche en condiciones inadecuadas de trabajo en frigoríficos o establecimientos productores de leche, respectivamente, siendo las hamburguesas insuficientemente cocidas el principal vector de la enfermedad y la leche cruda sin pasteurizar o los productos lácteos elaborados con ésta, otro factor de riesgo. En la industria láctea, el yogur se elabora con leche que es sometida a un doble tratamiento térmico. En la bibliografía moderna reportes de la presencia de STEC en yogures industriales, y los trabajos de revisión y meta-análisis no incluyen al yogur, pero sí a la leche sin pasteurizar, como vectores de trasmisión de STEC. En este contexto, y dada la evidencia científica disponible actualmente en relación a E. coli productor de toxina Shiga, el SUH y el yogur, parecería que estamos ante la presencia de una correlación espuria, la asociación de dos hechos que no tienen relación causal entre sí, más que a un hecho científico del cual uno (el yogur) es el responsable del otro (SUH).

Abstract On November 27, 2008, a foodborne disease outbreak associated with the consumption of chicken salad occurred in a kindergarten in the District of Hurlingham, Province of Buenos Aires. Thirty-seven children and 10 adults with gastrointestinal symptoms were affected. Five children were hospitalized with signs of dehydration, one of them requiring intensive care. Staphylococcus aureus subsp. aureus was isolated from the mentioned food in 4 out of 5 stool specimens from the patients, and in 3 out of 5 food handlers (nose of food handler #1, hands of food handlers #2 and 3). The isolates carried the genes coding for enterotoxins SEA and SED. The macrorestriction patterns showed 100% similarity by pulsed-field gel electrophoresis using the SmaI enzyme. A timely outbreak investigation allowed us to identify the causative agent of the food poisoning as well as the failures in food processing and to implement corrective measures.

Resumen El 27 de noviembre de 2008 ocurrió un brote de intoxicación alimentaria asociado al consumo de salpicón de ave en un jardín de infantes de Hurlingham, provincia de Buenos Aires. Treinta y siete niños y 10 adultos presentaron síntomas gastrointestinales. Cinco niños fueron internados con signos de deshidratación, y uno de ellos requirió cuidados intensivos. Se aisló Staphylococcus aureus subsp. aureus del alimento involucrado, de 4/5 muestras de materia fecal de pacientes y de 3/5 manipuladores (nariz del manipulador 1, manos de manipuladores 2 y 3). Las cepas aisladas portaban los genes que codifican las enterotoxinas SEA y SED. Por electroforesis de campo pulsado con la enzima SmaI, los patrones de macrorrestricción presentaron 100% de similitud. La investigación oportuna del brote permitió identificar al agente causal de la intoxicación, determinar las fallas en la elaboración del alimento e implementar las medidas correctivas correspondientes.

Escherichia coli produtora de toxina Shiga (STEC) O157:H7 é o sorotipo mais frequentemente identificado como o agente causador de colite hemorrágica e síndrome hemolítica urêmica (SHU), embora tenham sido descritas mais de 100 sorotipos com potencial patogênico semelhantes. O objectivo foi o de descrever os casos de doença humana associadas com a infecção por STEC O121:H19, assistido, na cidade de Mar del Plata e estabelecer relação genética de isolados utilizando epidemiologia molecular. Um amplo espectro foi observado na severidade clínica dos oito casos estudados, dois eram assintomáticos (contacto SHU), uma paciente teve diarreia com sangue, e cinco tiveram SHU. Um caso de SHU faleceu. As cepas O121:H19 portaram o genótipo stx2a/eae/ehxA, foram sensíveis aos antibióticos testados e apresentaram, por eletroforese em gel de campo pulsado (Xbal-PFGE), diferentes padrões de macrorestrição, com similaridade de 84,25%. O padrão AREXKX01.0072 detectado em SHU e em seu contato, é novo para a Base de Dados Nacional de STEC não-O157 na Argentina. O uso de métodos padrão de detecção e tipagem de STEC permite os laboratórios de referência monitorar frequência temporal e distribuição geográfica de estirpes circulantes para a prevenção e controlo destes agentes patogénicos associados com a doença humana.

Shiga toxin-producing Escherichia coli (STEC) O157:H7 is the most frequent serotype identified as causative agent of sporadic cases and outbreaks of diarrhea with or without blood, hemorrhagic colitis and hemolytic uremic syndrome (HUS), although more than 100 serotypes have been described of similar pathogenic potential. The aim of the study was to describe cases of human disease associated with STEC O121:H19 infections, assisted in Mar del Plata City, and to establish the genetic relationship of the isolates by molecular epidemiology techniques. A wide spectrum was observed in the clinical severity of the eight cases studied: two were asymptomatic (contacts of HUS), one patient had bloody diarrhea, and five cases presented HUS. One HUS case died. All STEC O121:H19 strains carried the stx2a/eae/ehxA genotype, were sensitive to all antibiotics tested and showed different macrorestriction patterns by pulsed-field gel electrophoresis (Xbal-PFGE), with 84.25% similarity. The pattern AREXKX01.0072, detected in a HUS case and in his contact, is new in the Argentine National Database of non-O157 STEC. The use of standardized methods for detection and typing of STEC allows reference laboratories to monitor the temporal frequency and geographical distribution of circulating strains for the prevention and control of these pathogens associated with human diseases.

Escherichia coli productora de toxina Shiga (STEC) O157:H7 es el serotipo más frecuentemente identificado como agente causal de colitis hemorrágica y síndrome urémico hemolítico (SUH), aunque se han descripto más de 100 serotipos con potencial patogénico similar. El objetivo del trabajo fue describir casos de enfermedad humana asociados a la infección por STEC O121:H19, atendidos en la ciudad de Mar del Plata y establecer la relación genética de los aislamientos mediante técnicas de epidemiología molecular. Se observó un amplio espectro en la severidad clínica de los ocho casos estudiados: dos fueron asintomáticos (contactos de SUH), un paciente tuvo diarrea sanguinolenta, y cinco presentaron SUH. Uno de los pacientes con SUH falleció. Las cepas O121:H19 portadoras del genotipo stx2a/eae/ehxA fueron sensibles a los antibióticos ensayados y presentaron por electroforesis en gel de campo pulsado (Xbal-PFGE) distintos patrones de macrorrestricción, con similitud del 84,25%. El patrón AREXKX01.0072, detectado en un SUH y en su contacto, es nuevo en la Base de Datos Nacional de STEC no-O157 de la Argentina. La utilización de métodos estandarizados de detección y tipificación de STEC permite a los laboratorios de referencia monitorear la frecuencia temporal y la distribución geográfica de las cepas circulantes para la prevención y control de estos patógenos asociados a enfermedad humana.

The objectives of this study were: (1) to estimate STEC frequency in hide and carcass samples taken from beef slaughterhouses supplying the domestic market in Argentina, (2) to establish the pheno-genotypic characteristics of STEC and non-toxigenic Escherichia coli of serogroups O26, O45, O103, O121, O111, O145 or O157 isolated from the analyzed samples and, (3) to study their clonal relatedness. Sixty hides and 60 carcasses were analyzed. At the screening step, 48% of hide and 80% of carcass samples tested positive for the stx gene by endpoint PCR. The STEC isolation rate was 5% for hides and 8% for carcasses. The isolation rate of STEC-positive for O26, O45, O103, O111, O145 or O157 serogroups was 0% for hides and 2% for carcasses. With the purpose of studying the clonal relatedness of isolates, macrorestriction fragment analysis by pulsed-field gel electrophoresis was performed. The results indicated cross-contamination between hides and between carcasses of animals in the same lot and, that the origin of carcass contamination was their own hide, or the hides of other animals in the same lot. The high detection rate at the screening step, especially in carcasses, and the evidence of cross-contamination show the need to apply additional in-plant intervention strategies aimed at preventing carcass contamination.

Los objetivos del presente estudio fueron tres: 1) estimar la frecuencia de Escherichia coli productor de toxina Shiga (STEC) en muestras de cuero y carcasa de bovinos en frigoríficos de consumo interno de Argentina; 2) realizar la caracterización feno-genotípica de las cepas STEC y de Escherichia coli no toxigénicas pertenecientes a los serogrupos O26, O45, 0103, O121, O145 u O157 aisladas a partir de las muestras analizadas; 3) establecer la relación clonal de ese conjunto de cepas. Se analizaron 60 cueros y 60 carcasas. En la etapa de tamizaje, el gen stx se detectó en el 48% de las muestras de cuero y en el 80% de las muestras de carcasa por una PCR de punto final. La frecuencia de recuperación de cepas STEC fue del 5% en cueros y del 8% en carcasas, y la de cepas STEC positivas para los serogrupos O26, O45, O103, O121, O111, O145 u O157 fue del 0% en los cueros y del 2% en las carcasas. La relación clonal de las cepas aisladas se investigó a través de electroforesis de campo pulsado y análisis de los patrones de macrorrestricción generados. Los resultados demostraron la existencia de contaminación cruzada entre cueros y carcasas de animales pertenecientes a un mismo lote, y también que el origen de la contaminación fue el propio cuero del animal o el cuero de otros animales pertenecientes al mismo lote. Los altos porcentajes de detección en la etapa de tamizaje, especialmente en carcasas, y la evidencia de contaminación cruzada ponen de manifiesto la necesidad de evaluar la implementación de estrategias de intervención tendientes a evitar la contaminación de carcasas.

Cattle are the main reservoir of Shiga toxin-producing Escherichia coli (STEC), and the strategies to prevent the transmission of these microorganisms are concentrated in the slaughtering plant. The aim of this study was to evaluate the hygienic-sanitary quality and the frequency of detection of STEC in beef carcasses in abattoirs from Tucuman province. Two hundred and seventy four beef carcass sponges were processed; the count of generic E. coli was marginal in 9 (3,3%) of them. Escherichia coli O157 was isolated in 4 (1,4%) samples; 2 of which were characterized as stx2c(vh-a)/eae/ehxA whereas the other 2 were non-toxigenic strains. Non-O157 E. coli ONT:H49, stx2a/ehxA/saa was isolated from 1 sample (0,4%). In this work the quality of the analyzed product indicates that the good practices of manufacture are fulfilled in slaughtering facilities in Tucumán province.

Los bovinos son el principal reservorio de Escherichia coli productor de toxina Shiga (STEC); las estrategias para evitar su transmisión se concentran en la planta de faena. El objetivo de este trabajo fue evaluar la calidad higiénico-sanitaria y la frecuencia de detección de STEC en medias reses bovinas de frigoríficos de tránsito provincial. Se procesaron 274 esponjados de media res; en 9 (3,3%) el recuento de E. coli genérico fue marginal, en 4 (1,4%) se aisló E. coli O157, de los cuales 2 fueron caracterizados como stx2c(vh-a)/eae/ehxA, y los otros 2 como no toxigénicos. A partir de una (0,4%) muestra se aisló E. coli no-O157 ONT:H49, stx2a/ehxA/saa. En este trabajo la calidad del producto analizado indica que en la provincia de Tucumán se cumplen las buenas prácticas de manufactura en la faena de bovinos.

Enteropathogenic Escherichia coli (EPEC) is a major causative agent of acute diarrhea in children in developing countries. This pathotype is divided into typical EPEC (tEPEC) and atypical EPEC (aEPEC), based on the presence of the bfp virulence factor associated with adhesion, encoded in the pEAF plasmid. In the present study, the isolation of aEPEC O157:H16 from a bloody diarrhea case in a child and his household contacts (mother, father and sister) is described. The strain was characterized as E. coli O157:H16 eae-ε-positive, sorbitol fermenter with β-glucuronidase activity, susceptible to all antimicrobials tested, and negative for virulence factors stx1, stx2, ehxA and bfp. XbaI-PFGE performed on all isolates showed the AREXHX01.1040 macrorestriction pattern, with 100 % similarity. These results highlight the importance of epidemiological surveillance of E. coli O157-associated diarrhea cases identified in children and their family contacts, as well as the incorporation of molecular techniques that allow the detection of the different E. coli pathotypes.

Escherichia coli enteropatógeno (EPEC) es uno de los principales agentes de diarrea infantil aguda en los países en desarrollo. Se clasifica en típico (tEPEC) y atípico (aEPEC) sobre la base de la presencia del factor bfp, asociado a la adherencia y codificado en el plásmido pEAF. Se describe el aislamiento de E. coli O157:H16, de la categoría aEPEC, en un caso de diarrea sanguinolenta infantil y en sus contactos familiares. De las muestras de materia fecal del niño, de la madre, del padre y de la hermana se aisló E. coli O157:H16 eae-ε-positivo, sorbitol-positivo, β-glucuronidasa-positivo, sensible a los antimicrobianos ensayados, y negativo para los factores stx1, stx2, ehxA y bfp. Por XbaI-PFGE, todos los aislamientos presentaron el patrón de macrorrestricción AREXHX01.1040, con 100 % de similitud. Es importante la vigilancia epidemiológica de los casos de diarrea asociados a E. coli O157 y sus contactos familiares, y la incorporación de técnicas para detectar los distintos patotipos de E. coli.

Escherichia coli O157 is an emergent pathogen associated with diarrhea, hemorrhagic colitis and hemolytic uremic syndrome. Meat products constitute an important transmission source of this microorganism. The aims of this study were to characterize E. coli O157 isolated from cattle and meat products collected from abattoirs and retail stores, to establish the clonal relatedness among regional isolates and to compare them with those in the national database. Between 2004 and 2013, 169 minced meat, 35 sausage and 216 carcass samples were analyzed. Thirteen E. coli O157 isolates were identified; 6 of which were O157:H7 and characterized as stx2c(vh-a)/eae/ehxA (n = 5) and stx2/eae/ehxA (n = 1). The 7 remaining isolates were non-toxigenic E. coli strains, and serotyped as O157:NT (n = 4), O157:NM (n = 1), O157:ND (n = 1) and O157:H16 (n = 1). The strains yielded different XbaI-PFGE patterns. Compared to the E. coli O157 isolates in the National Database, none of these patterns have been previously detected in strains of different origin in Argentina.

Escherichia coli O157 es un patógeno emergente asociado a diarrea, colitis hemorrágica y síndrome urémico hemolítico. Los productos cárnicos constituyen una importante fuente de contaminación con este microorganismo. Los objetivos de este estudio fueron establecer la frecuencia de detección de E. coli O157 en productos cárnicos y media res en la provincia de Tucumán, caracterizar los factores de virulencia de los aislamientos obtenidos, establecer la relación clonal entre cepas regionales mediante electroforesis de campo pulsado y comparar con lo consignado en la base de datos nacional. Desde 2004 hasta 2013 se analizaron 169 muestras de carne picada, 35 embutidos y 216 esponjados de media res. Se identificaron 13 aislamientos de E. coli O157; 6 de ellos fueron O157:H7 productores de toxina Shiga y se caracterizaron como stx2c(vh-a)/eae/ehxA (n = 5) y stx2/eae/ehxA (n = 1); los 7 aislamientos de E. coli O157 no toxigénicos fueron O157:NT(n = 4),O157:NM (n = 1),O157:ND (n = 1) y O157:H16 (n = 1). Los patrones de PFGE fueron diferentes entre sí y de los registrados en la base de datos nacional. Se concluye que existe gran diversidad genética en los aislamientos de E. coli O157 circulantes en nuestra región.

Groundwater is an important source of drinking water for many communities in Northern Argentina; particularly, in the province of Chaco, where about 14 % of households use this natural resource. Enteroaggregative Escherichia coli is an emerging pathogen whose global importance in public health has increased in recent years. Despite the significant risk of disease linked to contaminated water exposure, the prevalence of E. coli pathotypes in aquatic environments is still not so well defined. The aim of the present study was to detect the presence of typical enteroaggregative E. coli through the recognition of its virulence factors aap, AA probe and aggR by molecular techniques. A total of 93 water samples from different small communities of Chaco were analyzed. E. coli was identified in 36 (38.7 %) of the tested samples. Six strains isolated from different samples harbored the studied genes. Of these 6 isolates, 3 carried the aap gene, 2 the AA probe and the last one the combination of aap/aggR genes. The prevalence of E. coli isolates harboring enteroaggregative virulence genes in groundwater sources was 6.4 %. This work represents the first contribution to the study of the presence and distribution of virulence genes of EAEC in groundwater sources in this region of Argentina.

En la provincia del Chaco, el agua subterránea representa una fuente alternativa, y muchas veces única, para el consumo humano; esta es utilizada en el 14 % de los hogares. A pesar de que se reconoce el riesgo de la exposición al agua contaminada, la prevalencia de los diferentes patotipos de Escherichia coli en ambientes acuáticos no ha sido bien caracterizada. E. coli enteroagregativo (ECEA) es un patógeno emergente cuya importancia en la salud pública mundial se incrementó y quedó claramente establecida en los últimos años. El objetivo del presente trabajo fue detectar la presencia de ECEA típico mediante el reconocimiento de los factores de virulencia aap, AA probe y aggR por reacción en cadena de la polimerasa, en fuentes de agua subterráneas de la provincia del Chaco. Se identificó E. coli en 36 (38,7 %) de las 93 muestras estudiadas, provenientes de diferentes localidades. De esos 36 aislamientos, se identificaron 6 (16,7 %) portadores de los genes de ECEA, lo que representa una prevalencia del 6,4 % considerando las 93 fuentes de agua subterránea estudiadas. De esos 6 aislamientos, 3 eran portadores del gen aap, 2 del gen AA probe y uno de la combinación aggR/aap. El presente trabajo representa el primer aporte en el estudio de la presencia y distribución de genes de virulencia de ECEA en fuentes de agua subterránea de la región.

We describe the first isolation of an enteroaggregative Escherichia coli (EAEC) O104:H4 strain associated with an acute diarrhea case in Argentina. Two multiplex PCRs (mPCR) were performed as screening of genes mPCR1 (eae, lt, and st) and mPCR2 (IpaH, aggR, stx1 and stx2). A mPCR to detect the rfbO104, fliC H4 and terD genes, and PCR assays for the detection of pCVD432 plasmid, aaiC and lpfO113 genes were included. Biochemical and antimicrobial susceptibility assays as well as serotyping were performed. The identified E. coli strain was susceptible to all antimicrobials tested and harbored the aggR, aaiC, pCVD432 plasmid, lpfO113, rfbO104, fliC H4 and terD genes. Although serotype EAEC O104:H4 rarely spreads and sporadic cases have been reported, global concern increased after the large-scale outbreak in Europe in 2011. The finding of EAEC O104:H4 reinforces the need for improved methodologies for the detection of all E. coli pathotypes.

Se describe el primer aislamiento de una cepa de Escherichia coli enteroagregativo (EAEC) O104:H4 de un caso de diarrea aguda en Argentina. Se realizaron dos PCR múltiples como tamizaje: mPCR1 para los genes eae, lt y st, y mPCR2 para los genes IpaH, aggR, stx1y stx2. Se incluyó una mPCR para detectar los genes rfbO104, fliC H4 y terD, además de PCR simples para los genes del plásmido pCVD432, aaiC y lpfO113. Se realizaron ensayos bioquímicos, de sensibilidad a los antimicrobianos y de serotipificación. La cepa de E. coli identificada fue sensible a todos los antimicrobianos ensayados y presentó los genes aggR, aaiC, plásmido pCVD432, lpfO113, rfbO104, fliC H4 y terD. Si bien EAEC O104:H4 es un serotipo poco común, se han comunicado casos esporádicos, pero la preocupación global aumentó después del brote masivo ocurrido en Europa en 2011. El hallazgo de EAEC O104:H4 refuerza la necesidad de mejorar las metodologías para la detección de todos los patotipos de E. coli en Argentina.

Escherichia coii produtora de toxina Shiga (STEO), especialmente do sorotipo 0157:H7, é associado com a ocorrència de casos esporádicos e surtos de diarreia sanguinolenta (DS) e a síndrome urèmica hemolítica (HUS). 0utros sorotipos STEO como 026H11, 0103H2, 0111NM, 0113H21, e 0145NM também podem causar doengas severas. Na Argentina, é o sorotipo prevalente seguindo em frequència 0145-.NM. 0 objetivo deste estudo foi determinar a diversidade genética e a relagäo clonal de cepas de E. coii 0145:NM/H27 isoladas em diferentes locais da provincia de Buenos Aires, no período 2004-2009. Foi realizado POR em um total de 17 cepas isoladas de casos de HUS (9), DS (5) e de contatos assintomáticos (3) para detectar genes stx1, stx2, rfbO157, eae e ehxA e eletroforese em gel em campos pulsados (Xba\ -PFGE) para estabelecer diversidade genética e a relagäo clonal. Todos os isolamentos foram caracterizados genotipicamente como stx2/eae/ehxA. Por Xba\-PFGE foram obtidos 14 padröes diferentes, identificando um só cluster. Através da subtipificagäo molecular foi conformada a base de dados de E. coii 0145:NM/H27 isolados na regiäo, que irá permitir monitorar os perfis Xba\-PFGE visando identificar precocemente a provável ocorrència de um surto na populagäo e notificar às autoridades para implementar medidas de controle.

SHIGA TOXIN-PRODUCING Escherichia coli (STEC), especially the serotype 0157-.H7, is associated with the occurrence of sporadic cases and outbreaks of bloody diarrhea (DS) and hemolytic uremic syndrome (HUS). Other STEC serotypes such as 026:H11, 0103:H2, 0111:NM, 0113:H21, and 0145:NM can also cause severe human illness. In Argentina 0157:H7 is prevalent, followed in frequency by serotype 0145:NM. The aim of this study was to determine the genetic diversity and clonal relationship of E. coM 0145:NM/ H27 strains isolated in different locations of the Buenos Aires province, in the period 2004-2009. A total of 17 strains isolated from HUS (9), DS (5) and asymptomatic contacts (3) were characterizea by POR to detect stXj, stx2, rfbO157, eae and ehxA genes, and pulsed-field gel electrophoresis (Xbal-PFGE) to establish the genetic diversity and the clonal relationship. All isolates were characterized as stx2/eae/ehxA. By Xba\-PFGE, 14 different patterns were established, with a single cluster identified. A regional database of E. coii 0145:NM/H27 was created, which will monitor the \-PFGE profiles of the circulating strains in order to identify the probable occurrence of an outbreak in the community and report to the authorities to implement control measures.

Escherichia coli productora de toxina Shiga (STEC), fundamentalmente del serotipo O157:H7, está asociada a la ocurrencia de casos esporádicos y brotes de diarrea sanguinolenta (DS) y síndrome urémico hemolítico (SUH). Otros serotipos STEC como O26:H11, O103:H2, O111:NM, O113:H21 y O145:NM también pueden causar enfermedad severa. En Argentina O157:H7 es el serotipo prevalente siguiéndole en frecuencia O145:NM. El objetivo del presente trabajo fue establecer la diversidad genética y la relación clonal de cepas de E. coli O145:NM/H27 aisladas en diferentes localidades de la provincia de Buenos Aires en el período 2004-2009. A 17 cepas aisladas de casos de SUH (9), DS (5) y de contactos asintomáticos (3) se les realizó PCR para detectar genes stx1, stx2, rfbO157, eae y ehxA y electroforesis en gel en campos pulsados (Xbal-PFGE) para establecer diversidad genética y relación clonal. Todos los aislamientos fueron caracterizados genotípicamente como stx2/eae/ehxA. Por %baI-PFGE se obtuvieron 14 patrones diferentes, identificándose un único Cluster. Mediante la sub-tipificación molecular se conformó la base de datos de E. coli O145:NM/ H27 aislados en la región que permitirá monitorear los perfiles %baI-PFGE a fin de identificar tempranamente la probable ocurrencia de un brote en la población y notificar a las autoridades para aplicar acciones de control.